細胞植物(系)的應用給醫學(xué)研究和測試帶來(lái)了極大的便利。然而,細胞代代相傳是有限的。長(cháng)期持續的細胞不僅消耗大量的人力物力,而且細胞的生長(cháng)和形態(tài)也會(huì )有一定的退化或轉化。因此,細胞失去了原有的遺傳特性,有時(shí)會(huì )因細胞污染而中斷代代,失去種子。因此,在日常工作中,經(jīng)常需要冷凍一定數量的細胞進(jìn)行替代。細胞冷凍和恢復是細胞培養室的常規工作和通用技術(shù)。定制液氮罐
細胞凍存簡(jiǎn)述
目前,常用的細胞冷凍技術(shù)是液氮冷凍儲存方法,主要采用緩慢的冷凍方法,加入適量的保護劑來(lái)冷凍細胞。細胞直接冷凍,沒(méi)有任何保護劑,細胞內外的水很快就會(huì )產(chǎn)生霜凍,從而引起一系列的不良反應。如果細胞脫水增加局部電解質(zhì)濃度,pH值變化,部分蛋白質(zhì)因上述原因變性,導致細胞內部空間布局紊亂,溶酶體膜受損釋放溶酶體酶,破壞細胞內成分,線(xiàn)粒體腫脹,功能喪失,阻礙能量消耗。細胞膜上的蛋白質(zhì)復合體也很容易破壞,導致細胞膜通透性的變化和細胞內容的丟失。如果細胞中有更多的霜凍,隨著(zhù)冷凍溫度的降低,霜凍體積的膨脹會(huì )導致細胞核DNA空間結構的不可逆轉損傷,導致細胞死亡。液氮罐
因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能減少細胞中的水分,減少細胞中霜凍的形成。選擇甘油或二甲基亞砜作為保護劑,這兩種物質(zhì)含量小,溶解性大,易于通過(guò)細胞,可降低冰點(diǎn),提高細胞膜對水的滲透性,對細胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法可以使細胞中的水滲出細胞,減少細胞中冰結晶的機會(huì ),從而減少霜凍對細胞的損害
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