如何在液氮罐中保存大量細胞?液氮罐通常充滿(mǎn)低溫液氮。細胞的儲存需要低溫。將其放入-196度的液氮中,是細胞長(cháng)期保存的合適環(huán)境。細胞冷凍液氮罐是將細胞儲存在液氮罐的液相中。它有一個(gè)特殊的方形抽屜提籃。將2ml冷凍儲存管放入冷凍儲存箱中,然后倒入提籃中,浸入液氮中,浸入其中。只有使細胞處于液氮-196度的環(huán)境中,細胞才能長(cháng)期保存。
細胞冷凍液氮罐的具體操作步驟:
1、培養皿或培養瓶中的細胞按常規方法消化,或分離獲得原代細胞后,在離心管中收集。
2、使用離心機離心,去除上清,收集細胞沉淀。
3、根據細胞生長(cháng)密度,加入適量的LiveCyteTM細胞凍存液進(jìn)行重懸,充分混合。
4、將細胞懸液放入冷凍儲存管中,直接放入-80°C冰箱儲存。24小時(shí)后可移入液氮長(cháng)期保存(可選)。
細胞冷凍液氮罐的細胞恢復過(guò)程:
1、從-80°從C冰箱或液氮罐中取出細胞。
2、快速放進(jìn)37°C水浴,不時(shí)搖晃,在3分鐘內融化。金鳳液氮罐
3、在冷凍儲存管中加入少量培養液,然后將細胞混合液轉移到含有培養液的離心管中。樣品與培養液的比例為1:10、然后輕輕吹打,攪拌均勻。
4、離心后清除上清,收集細胞沉淀。
5、輕輕彈性細胞沉淀,在培養瓶或培養皿中加入適量培養液,輕輕搖晃,使細胞分布均勻,在37℃孵化器中培養。
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